Практическая Молекулярная Биология - главная страница.
 > Растворы > Стоковые растворы антибиотиков.

Антибиотики (стоковые растворы).

В этом разделе описывается приготовление, хранение и применение стоковых растворов. Биологические свойства антибиотиков описано в главе 01_04.

    Инструкция по работе с прописями растворов откроется в новом окне при нажатии на эту кнопку:


    Рабочие концентрации и стоковые растворы.

     стоковый раствор рабочая концентрация:
    строгий контрольослабленный контр.
    mg/ml:         µg/mlразведениеµg/mlразведение
    Ampicillin50 (H2O*)-20oC200.4 µl/ml60-1251.2-2.5 µl/ml
    Carbenicillin50
    (H2O, 50%EtOH)
    -20oC200.4 µl/ml60-2001.2-4 µl/ml
    Chloramphenicol34
    (EtOH, MetOH)
    -20oC250.7 µl/ml1705 µl/ml
    D-cycloserine*10
    (0.1M NaP pH8.0)
    +4oC20020 µl/ml  
    Gentamycin10 (H2O)-20oC151.5 µl/ml  
    Hygromycin B10 (H2O)-20oC101 µl/ml40040 µl/ml
    Kanamicin50 (H2O)+4oC-
    -20oC
    100.2 µl/ml501 µl/ml
    Kasugamycin10 (H2O)-20oC1000100 µl/ml  
    Nalidixic acid5
    (H2O, pH до 11 /NaOH)
    -20oC153.0 µl/ml  
    Neomycin10 (H2O)-20oC10010 µl/ml80080 µl/ml
    Rifampicin**34 (MetOH)-20oC1504.4 µl/ml  
    Spectinomycin10 (H2O)-20oC10010 µl/ml  
    Streptomicin50 (H2O)-20oC100.2 µl/ml501 µl/ml
    Tetracycline***5 можно и 12.5
    (EtOH, 70%EtOH)
    -20oC102 µl/ml50
    100
    10 µl/ml
    20 µl/ml

    * - Раствор нестабилен, готовить перед использованием;
    ** - Светочувствителен;
    *** - Светочувствителен, Mg2+ - ингибитор;

    Приготовление стоковых растворов.

    Ампициллин.

    Конц.1ml5ml10ml
    Ампицилин50mg/ml50mg250mg0.5g
    H2O 1ml5ml10ml
  • Стерилизовать фильтрованием или готовить на стерильной воде из стерильного порошка.
  • Хранить при -20oС в небольших аликвотах (<10 размораживаний).
  • Вместо H2O можно использовать 50% глицерин. Преимущество последнего - он не замерзает при -20oС.
  • В некоторых лабораториях ампициллин разводят в 96o(или 50o) EtOH. У этого способа 2 достоинства: (i) раствор не замерзает при хранении, (ii) раствор самостерилизуется. Но есть и весьма серьёзный недостаток: спирт - слабый катализатор расщепления кольца раствор ампициллина становится нестабильным.
  • Карбенициллин.

    Конц.1ml5ml10ml
    Carbenicillin50mg/ml50mg250mg0.5g
    H2O 1ml5ml10ml
  • Стерилизовать фильтрованием или готовить на стерильной воде из стерильного порошка.
  • Хранить при -20oС в небольших аликвотах (<10 размораживаний).
  • 200 µg/ml для pETpfu.
  • Смесь антибиотиков GE (50x).

    Конц.40ml
    Cefotaxime 25µg/ml25µg/ml1mg
    Ceftriaxone 25µg/ml25µg/ml1mg
    Фосфат калия (pH 6.0) 0.1M 40ml
  • Стерилизовать фильтрованием или готовить на стерильном буфере из стерильного порошка.
  • Хранить при -200С, min количество циклов замораживания - оттаивания.
  • Тетрациклин.

    Конц.1ml5ml10ml
    Tetracycline5mg/ml5mg25mg50mg
    EtOH 1ml5ml10ml
  • Раствор в EtOH, хранить при -20oС.
  • Mg++- антагонист, для селекции использовать среды без катионов Mg.
  • Хлорамфеникол.

    Конц.1ml5ml10ml
    Хлорамфеникол34mg/ml34mg170mg340mg
  • Хранить 4oС сухой, -20oС (раствор в EtOH);
  • BL21(DE3)pLyzS - 34µg/ml -> 1µl на 1ml среды.

"Практическая Молекулярная Биология" http://molbiol.edu.ru
e-mail: pmb@molbiol.edu.ru


Rambler's Top100