Практическая Молекулярная Биология - главная страница.
 > Методы > Разное > Гель-фильтрационные колонки.

Изготовление G-50 spin-колонок.


  1. заранее:
  2. Гель-фильтрационная колонка

    приготовить суспензию G-50, medium в STE (~90% суспензии и 10% свободной жидкости). Готовить не торопясь, т.к. для набухания G-50 требуется некоторое время. Либо дать постоять при 4oС в течении ~суток, либо проавтоклавировать (второй вариант предпочтительнее);

  3. нарезать GF-C квадратиками по ~2.5х2.5mm2
  4. один квадратик поместить в синий (1ml) тип и плотно утрамбовать в конце типа стеклянным капилляром;
  5. непосредственно перед использованием G-50 суспензию взболтать (без пузырей!);
  6. заливать типы по одному: налить 1ml суспензии и сразу же "стряхнуть" (как градусник), чтобы в нижней части не остался пузырёк воздуха;
  7. замотать нижнюю и верхнюю части парафильмом (в указанном порядке);
  8. хранить при 4oС (можно более года).


    Комментарии.

    Общие.

  • Удобно готовить сразу помногу колонок (~100 штук). Перед применением снимать парафильм в следующем порядке: сначала верхний, потом нижний (иначе есть опасность втянуть GF-C - затычку внутрь типа и испортить колонку).
  • Не следует центрифугировать колонки при скоростях выше ~2.5krpm.
  • Наполнитель для колонок может быть не только G-50. Выбор зависит от предполагаемого применения. G-50 хорош для очистки от не включившихся dNTP’s.
  • По пунктам.

    п.1.

  • Можно использовать и G-50 coarse; fine. "Medium" указан из за того, что, по нашему мнению, это самый удобный вариант.

"Практическая Молекулярная Биология" http://molbiol.edu.ru
e-mail: pmb@molbiol.edu.ru


Rambler's Top100