Практическая Молекулярная Биология - главная страница.
 > Методы > Клонирование > ДНК полимеразы.

Свойства DNA полимераз.


  • Таблица в формате MS Word и удобнее и полнее.


  •  AmpliTaqR ***Stoffel Fragment ****Pfu Vent Vent(exo-) Deep Vent
    MW94kDa61.3kDa90kDa   
    Single chain or subuinitssinglesinglesingle   
    Number of amino acids832544    
    Optimal extension temperature72-80 oC72-80 oC72-80 oC72-80 oC  
    Extension rate (72oC)2-4 kb/min2-4 kb/min ~1 kb/min  
    Reverse transcriptase activityminimal, lowminimal, lowminimal, low   
    Half-life97.5oC/10'

    97oC/40'

    92.5oC/>130'
    97.5oC /20'

    97oC/80'

    95oC/4h100oC /2h

    95oC/8h
      
    c 10% глицеролом95oC/>60'?95oC/>60'   
    с 5% формамидом95oC/16'?95oC/16'   
    с 10% формамидом95oC/2'?95oC/2'   
    c 10% глицеролом

    5% формамидом
    95oC/24'?95oC/24'   
    процессивность

    (оснований)
    50-60 (42-30)5-1020-304-104-10 
    5'-3' экзо. активностьестьнетнетнетнетнет
    3'-5' экз. активностьнетнетестьестьнетесть
    A-tailдада (меньше)нетнетнет 
    Km (DNA)1.4nM1.4nM 0.1nM0.1nM0.01nM
    Km (dNTP)16µM  60µM40µM50µM
    Удельная активность250000u/mg 22500u/mg   
    Strand displacementнет  естьесть 
    Ник трансляцияесть  нетнетнет
    3' dNMP обменнет  естьнетесть
    Частота ошибок (х10-6)285501.657190 
    длина PCR продукта~5kb*    
    Mg2+1-4mM2-10mM1.5-8mM1-10mM  
    pH7.0-7.57.0-7.57.0-7.5   
    dNTP40 -200µM40-200µM~200µM*   
    KCl50mM10mM 0-100mM, 5-50mM (NH4)2SO4  
    праймер0.1-1.0µМ0.1-1.0µМ    
    Примечания  A278=0.74 для 1mg/ml.**  

    * - низкие концентрации могут активизировать 3'-5' экзонуклеазную активность.
    ** - Mn2+- ингибитор полимеризации (50% снижение активности при 0.15mM MnCl2 в присутствии 3mM MgCl2.
    *** - AmpliTaqR – вариант Taq polymerase у которой отсутствуют первые 3 аминокислоты (синтез начинается со второго Met патент US5079352).
    **** - Stoffel Fragment - вариант Taq polymerase у которой отсутствуют первые 289 аминокислот (патент US5079352).


"Практическая Молекулярная Биология" http://molbiol.edu.ru
e-mail: pmb@molbiol.edu.ru


Rambler's Top100