Практическая Молекулярная Биология - главная страница.
 > Методы > Выделение ДНК из агарозного геля > С помощью центрифугирования.

Выделение ДНК из агарозного геля с помощью центрифугирования.

 
 

    Для простых применений не требующих количественной элюции, DNA не слишком большого размера (<5kbp) можно выделить из агарозы с эффективностью >50% с помощью spin-центрифугирования через любой относительно крупнопористый фильтр. Можно использовать коммерческие spin-колонки, можно приготовить колонку самому (в качестве фильтра использовать GF/-, Whatman 3MM, типчик с аэрозольным фильтром и т.п).



  1. вырезать нужный кусок геля;
  2. поместить в spin-фильтр;
  3. ЦФ 1-5';
  4. собрать элюат.


    Комментарии.

    Общие.

  • Если использовать для электрофореза буфер TAE, выделенную ДНК без дальнейшей очистки можно использовать для лигирования, реакции Random Primer. Примесь агарозы не ингибирует рестрикцию.
  • Короткое описание метода создаёт иллюзию, что он самый удобный, но по нашему опыту элюция в PEG/TAE всё же удобнее.
  • Мы не рекомендуем использовать этот метод, если предполагается дальнейшая очистка DNA, так как тот же PEG/TAE даёт существенно более чистый стартовый материал.

"Практическая Молекулярная Биология" http://molbiol.edu.ru
e-mail: pmb@molbiol.edu.ru


Rambler's Top100