Практическая Молекулярная Биология - главная страница.
 > Методы > Электрофорез > Приготовление агарозного геля.

Заливка агарозного геля.


  1. взвесить необходимое количество агарозы (после взвешивания весы на "0" не сбрасывать);
  2. долить буфер до нужного объёма (измерять по весу; объём, занятый агарозой вы учитываете, не сбрасывая на "0" в п.1);
  3. сбросить весы на "0" (но не выключать, они ещё понадобятся в п.5);
  4. агарозу довести до кипения, кипятить 30-60'' (вынимать из микроволновой печи осторожно - может резко вскипеть);
  5. банку на весы, довести вес до "0" добавляя H2OmQ (осторожно - может резко вскипеть);
  6. остудить до 50-60oС (можно спокойно держать банку в руках), лучше с покачиванием;
  7. (дополнительно - для сборных плашек) "пролить" спейсеры, дать агарозе застыть в течении 2-4';
  8. залить плашки, дать агарозе застыть в течении 0.5-1h;
  9. либо использовать плашки в течении ~2h, либо не вынимая гребёнку завернуть в SaranWrap (SaranWrap накладывать на гребёнку свободно, без натяжения, иначе он её "перекосит"), и убрать в холодильник (можно хранить в течении месяца; для <1% гелей вынимать гребенку из геля можно лишь непосредственно перед применением.).

    Расход геля для различных типов плашек.

    сборная плашка 11х11см2110-140ml
    мягкая крышка "Techne"~90ml
    крышка от иммунологического планшета~30ml

    Форезная камера.

  • Форезные камеры бывают двух типов: с двумя или с одним платиновым электродом.
  • * камеры с двумя платиновыми электродами можно подключать к источнику напряжения в любой полярности.
    * камеры с одним - только одним способом!!! Обычно на таких камерах указана полярность подключения. Будьте внимательны.

  • Подготовка камеры:
    1. мыть губкой, смоченной детергентом;
    2. сполоснуть раз 10 водопроводной водой;
    3. сполоснуть раза 2-3 дистиллятом.
  • Форезные камеры имеют два уязвимых места:
  • * сравнительно легко при мытье отодрать платиновый электрод;
    * если при споласкивании или переносе держать камеру за один бортик, то в этом бортике появится трещина.

"Практическая Молекулярная Биология" http://molbiol.edu.ru
e-mail: pmb@molbiol.edu.ru


Rambler's Top100